Rekombinant Plazmit Transformasyonu Nedir? Ve Nasıl Yapılır?
Antibiyotikli Besi Ortamı
- Blog Yazısı
Rekombinant Plazmit Transformasyonu, genleri klonlamak için kullanılan bir yöntemdir.
Plazmit Nedir?: Plazmitler, bakteri hücrelerinde bulunan küçük halkasal DNA molekülleridir. Genellikle bir veya daha fazla gen taşırlar. Örneğin, antibiyotik direnci gibi yararlı özellikleri kodlayabilirler.[1]
Rekombinant Plazmit Transformasyonu: Bu işlemde, istediğimiz bir geni plazmit içine yerleştiririz. Bu gen, plazmitin içinde taşınır ve bakteri hücresine transfer edilir. Bakteri hücresi bu rekombinant plazmiti alır ve çoğaltır. Böylece gen kopyaları üretilir.
Neden Kullanırız?: Bu yöntem, genleri klonlamak ve daha sonra bu genleri incelemek için kullanılır. Örneğin, bir organizmadaki normal genlerin nasıl işlediğini anlamak için yapay, rekombinant gen versiyonları elde ederiz.
Teorik bilgilere az çok hakim olduğumuza göre "Rekombinant Plazmit Transformasyonu" nasıl yapıldığına geçebiliriz.
1- Plazmit DNA Hazırlığı:
Plazmit DNA’sı, genetik bilgileri taşıyan bir tür genetik materyaldir. Bu DNA istenilene uygun şekilde seçilir ve çoğaltılır. Restriksiyon enzimleri, DNA’yı kesmek için kullanılan özel enzimlerdir. Kesilmiş DNA’yı bir tüp içinde saklanır. Jel elektroforezi, DNA’nın boyutunu ve kesilip kesilmediğini doğrulamak için kullanılan bir yöntemdir.[2]
2- Hücre Hazırlığı:
Bakteri hücreleri, deneyde kullanılacak canlı organizmalardır. Bu hücreler yine istenilen amaca uygun olacak şekilde seçilir ve çoğaltılır. Hücreler soğuk kalsiyum klorür ile yıkanır. Bu işlem, hücrelerin dönüşüm sırasında plazmit DNA’sını daha iyi almasını sağlar.
3- Transformasyon:
Plazmit DNA’sını hücrelere eklenir. Bu, hücrelerin genetik materyali almasını sağlar. Elektroporasyon veya ısı şoku gibi yöntemlerle hücreleri dönüştürülür. Bu, plazmit DNA’sının hücre içine girmesini kolaylaştırır.
Evrim Ağacı'nın çalışmalarına Kreosus, Patreon veya YouTube üzerinden maddi destekte bulunarak hem Türkiye'de bilim anlatıcılığının gelişmesine katkı sağlayabilirsiniz, hem de site ve uygulamamızı reklamsız olarak deneyimleyebilirsiniz. Reklamsız deneyim, sitemizin/uygulamamızın çeşitli kısımlarda gösterilen Google reklamlarını ve destek çağrılarını görmediğiniz, %100 reklamsız ve çok daha temiz bir site deneyimi sunmaktadır.
KreosusKreosus'ta her 50₺'lik destek, 1 aylık reklamsız deneyime karşılık geliyor. Bu sayede, tek seferlik destekçilerimiz de, aylık destekçilerimiz de toplam destekleriyle doğru orantılı bir süre boyunca reklamsız deneyim elde edebiliyorlar.
Kreosus destekçilerimizin reklamsız deneyimi, destek olmaya başladıkları anda devreye girmektedir ve ek bir işleme gerek yoktur.
PatreonPatreon destekçilerimiz, destek miktarından bağımsız olarak, Evrim Ağacı'na destek oldukları süre boyunca reklamsız deneyime erişmeyi sürdürebiliyorlar.
Patreon destekçilerimizin Patreon ile ilişkili e-posta hesapları, Evrim Ağacı'ndaki üyelik e-postaları ile birebir aynı olmalıdır. Patreon destekçilerimizin reklamsız deneyiminin devreye girmesi 24 saat alabilmektedir.
YouTubeYouTube destekçilerimizin hepsi otomatik olarak reklamsız deneyime şimdilik erişemiyorlar ve şu anda, YouTube üzerinden her destek seviyesine reklamsız deneyim ayrıcalığını sunamamaktayız. YouTube Destek Sistemi üzerinde sunulan farklı seviyelerin açıklamalarını okuyarak, hangi ayrıcalıklara erişebileceğinizi öğrenebilirsiniz.
Eğer seçtiğiniz seviye reklamsız deneyim ayrıcalığı sunuyorsa, destek olduktan sonra YouTube tarafından gösterilecek olan bağlantıdaki formu doldurarak reklamsız deneyime erişebilirsiniz. YouTube destekçilerimizin reklamsız deneyiminin devreye girmesi, formu doldurduktan sonra 24-72 saat alabilmektedir.
Diğer PlatformlarBu 3 platform haricinde destek olan destekçilerimize ne yazık ki reklamsız deneyim ayrıcalığını sunamamaktayız. Destekleriniz sayesinde sistemlerimizi geliştirmeyi sürdürüyoruz ve umuyoruz bu ayrıcalıkları zamanla genişletebileceğiz.
Giriş yapmayı unutmayın!Reklamsız deneyim için, maddi desteğiniz ile ilişkilendirilmiş olan Evrim Ağacı hesabınıza üye girişi yapmanız gerekmektedir. Giriş yapmadığınız takdirde reklamları görmeye devam edeceksinizdir.
4- Seçici Ortamda Kültüre Etme:
Hücreleri seçici besiyerine eklenir. Bu besiyeri, sadece plazmit taşıyan hücrelerin hayatta kalmasını sağlar. Plazmit taşıyan hücreleri seçilir ve çoğaltılır. Bu, istenen genetik materyalin çoğalmasını sağlar. Böylelikle deneyin doğru bir şekilde ilerlediği tekrar kontrol edilmiş olur.
Şimdi ise size kendi yaptığım deneyden elde ettiklerimi paylaşmak istiyorum.
Deneye ilk olarak bir bakteriden alınmış plazmit DNA'sını istediğim hücrelerin bir kısmına ısı şoku yöntemi ile aktardım. Ardından elimdeki hücreleri üç farklı besi ortamına koydum. Benim aktarmak istediğim özellik antibiyotik direnci idi. Bu yüzden antibiyotikli besi ortamının yarısına başta elimde olan ve DNA'sı ile oynanmamış hücreleri, diğer tarafına ise antibiyotik direnci kazandırdığım hücreleri yerleştirdim ve büyümelerini gözlemledim. Antibiyotikli ortamda, direnci olmayan hücreler çoğalamazken, antibiyotik direnci geni taşıyan hücreler çoğalabildi. Böylelikle deneyin başarılı bir şekilde gerçekleştiğini anladım.
Aşağıya bu deneyi çizgi romansı bir tarzda anlatan kendi hazırladığım bir resim ve hücrelerin farklı ortamlarda büyümesini daha iyi anlamanız için birkaç görsel bırakacağım.
-
0
-
0
-
0
-
0
-
0
-
0
-
0
-
0
-
0
-
0
-
0
-
0
- ^ labakademi. Gen Klonlamak İçin Vektör: Plazmitler. (16 Temmuz 2024). Alındığı Tarih: 4 Temmuz 2024. Alındığı Yer: Lab Akademi | Arşiv Bağlantısı
- ^ labakademi. Jel Elektroforezi Nedir?. (11 Ağustos 2021). Alındığı Tarih: 4 Temmuz 2024. Alındığı Yer: Lab Akademi | Arşiv Bağlantısı
Evrim Ağacı'na her ay sadece 1 kahve ısmarlayarak destek olmak ister misiniz?
Şu iki siteden birini kullanarak şimdi destek olabilirsiniz:
kreosus.com/evrimagaci | patreon.com/evrimagaci
Çıktı Bilgisi: Bu sayfa, Evrim Ağacı yazdırma aracı kullanılarak 04/05/2025 07:06:59 tarihinde oluşturulmuştur. Evrim Ağacı'ndaki içeriklerin tamamı, birden fazla editör tarafından, durmaksızın elden geçirilmekte, güncellenmekte ve geliştirilmektedir. Dolayısıyla bu çıktının alındığı tarihten sonra yapılan güncellemeleri görmek ve bu içeriğin en güncel halini okumak için lütfen şu adrese gidiniz: https://evrimagaci.org/s/18032
İçerik Kullanım İzinleri: Evrim Ağacı'ndaki yazılı içerikler orijinallerine hiçbir şekilde dokunulmadığı müddetçe izin alınmaksızın paylaşılabilir, kopyalanabilir, yapıştırılabilir, çoğaltılabilir, basılabilir, dağıtılabilir, yayılabilir, alıntılanabilir. Ancak bu içeriklerin hiçbiri izin alınmaksızın değiştirilemez ve değiştirilmiş halleri Evrim Ağacı'na aitmiş gibi sunulamaz. Benzer şekilde, içeriklerin hiçbiri, söz konusu içeriğin açıkça belirtilmiş yazarlarından ve Evrim Ağacı'ndan başkasına aitmiş gibi sunulamaz. Bu sayfa izin alınmaksızın düzenlenemez, Evrim Ağacı logosu, yazar/editör bilgileri ve içeriğin diğer kısımları izin alınmaksızın değiştirilemez veya kaldırılamaz.
Şehirler arası yolculuk yaparken elektrik tellerinde gördüğümüz kırmızı beyaz topların işlevi nedir?
Zamanın Doğasındaki Gizem
Thales’in Tahmin Ettiği, Med-Lidya Savaşını Bitiren Güneş Tutulması
Toplumların Sayma Sistemleri Üzerine
"Paralel Evrenler, Paralel Hayatlar" Belgeseli
Max Tegmark'in Matematiksel Evren Hipotezi Üzerine Bir Eleştiri
